材料与仪器
染色质
甘油 染色质分离缓冲液溶液
JS-13 转桶式转头
甘油 染色质分离缓冲液溶液
JS-13 转桶式转头
步骤
1. 准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%(v/v)甘油/染色质分离缓冲液溶液。
2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃,1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度沉降。
3. 以 3 ml —份收集梯度顶部组分。
4. 每一组分固定少量样品(10~20 ml)于载玻片上,用相差显微镜观察确定含染色体的组分。
5. 收集含有纯化的染色体的样品。
6. 制备得到的样品用 JA-20 转头在 4℃,5000 r/min 离心 15 分钟以除去其中的甘油,用分离缓冲液重悬浮染色体沉淀。
2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃,1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度沉降。
3. 以 3 ml —份收集梯度顶部组分。
4. 每一组分固定少量样品(10~20 ml)于载玻片上,用相差显微镜观察确定含染色体的组分。
5. 收集含有纯化的染色体的样品。
6. 制备得到的样品用 JA-20 转头在 4℃,5000 r/min 离心 15 分钟以除去其中的甘油,用分离缓冲液重悬浮染色体沉淀。
来源:丁香实验