原理
羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以检验胎儿核型。
材料与仪器
碘酒 酒精 营养液 血清 秋水仙素 醋酸 甲醇
棉签 棉球 镊子 穿针 培养瓶
棉签 棉球 镊子 穿针 培养瓶
步骤
1. 抽取羊水
无菌抽取羊水10~20 ml,立即注入无菌离心管中;
2. 离心分离
1000 转/分,离心10 分钟,去上清,留0.5 ml;
3. 培养
加培养液4 ml(含小牛血清1 ml),用NaHCO3调pH至6.8,置37 ℃培养,在温箱中培养7~10 天后,可见大量成纤维细胞或上皮样细胞生长;加秋水仙素0.02~0.8 μg/ml营养液,作用10~12 小时;
4. 其余步骤与传代细胞培养染色体制备法相同。
无菌抽取羊水10~20 ml,立即注入无菌离心管中;
2. 离心分离
1000 转/分,离心10 分钟,去上清,留0.5 ml;
3. 培养
加培养液4 ml(含小牛血清1 ml),用NaHCO3调pH至6.8,置37 ℃培养,在温箱中培养7~10 天后,可见大量成纤维细胞或上皮样细胞生长;加秋水仙素0.02~0.8 μg/ml营养液,作用10~12 小时;
4. 其余步骤与传代细胞培养染色体制备法相同。
来源:丁香实验