原理
荧光免疫染色法显示细胞骨架具有清晰优点，但操作过程较复杂；考马斯亮蓝染色法简便易行，清晰度稍差，但如分化处理适当能提高清晰度。
材料与仪器
细胞
磷酸二氢钠 磷酸氢二钠 戊二醛 甲醇 冰醋酸 蒸溜水 考马斯亮蓝
培养瓶
磷酸二氢钠 磷酸氢二钠 戊二醛 甲醇 冰醋酸 蒸溜水 考马斯亮蓝
培养瓶
步骤
1. 固定液准备
0.1 M 磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O） 36.0 ml
蒸馏水 50.9 ml
（以上各液相混合后再加戊二醛）
25 %戊二醛 50.0 ml
染色液：
甲醇 46.5 ml
冰醋酸 7.0 ml
蒸溜水 46.5 ml
（以上各液相混合后再加染）
考马斯亮蓝 0.2g
2. 培养细胞
用支持物盖片培养法；
3. 固定
从培养瓶中取出细胞盖片，投入固定剂中固定15 分钟；
4. 漂洗
取出盖片先置蒸馏水中漂洗2 分钟，再用蒸馏水洗两次，每次1 分钟；
5. 染色
在考马斯亮蓝液中染色60 分钟；
6. 按4程序漂洗；
7. 分化
置入含甲醇冰醋酸液碟皿中（不含染料），在倒置显微镜直接窥视下，见细胞质内微丝逐渐明显，背地清亮时便终止；
8. 漂洗
按4处理；
9. 脱水→各度酒精→二甲苯；
10. 封片
用树胶封固；
11. 结果
细胞内微丝呈蓝色，如分化较好时背地清亮，反之会影响微丝的清晰度。
0.1 M 磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2O） 14.0 ml
0.1 M 磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O） 36.0 ml
蒸馏水 50.9 ml
（以上各液相混合后再加戊二醛）
25 %戊二醛 50.0 ml
染色液：
甲醇 46.5 ml
冰醋酸 7.0 ml
蒸溜水 46.5 ml
（以上各液相混合后再加染）
考马斯亮蓝 0.2g
2. 培养细胞
用支持物盖片培养法；
3. 固定
从培养瓶中取出细胞盖片，投入固定剂中固定15 分钟；
4. 漂洗
取出盖片先置蒸馏水中漂洗2 分钟，再用蒸馏水洗两次，每次1 分钟；
5. 染色
在考马斯亮蓝液中染色60 分钟；
6. 按4程序漂洗；
7. 分化
置入含甲醇冰醋酸液碟皿中（不含染料），在倒置显微镜直接窥视下，见细胞质内微丝逐渐明显，背地清亮时便终止；
8. 漂洗
按4处理；
9. 脱水→各度酒精→二甲苯；
10. 封片
用树胶封固；
11. 结果
细胞内微丝呈蓝色，如分化较好时背地清亮，反之会影响微丝的清晰度。
来源：丁香实验
