细胞骨架观察实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

细胞骨架（微丝和微管）是细胞质中重要的结构之一，近年研究证明CSL 与细胞运动以及细胞转化有密切关系。内容来源：组织培养和分子细胞学技术。（北京出版社）

来源：丁香实验

操作方法

鬼笔环肽显示微丝蛋白染色法

1. 盖片培养细胞（70 %～80 %汇合），PBS洗3 次； 2. 2 %的甲醛/PBS 液（甲醛按37 %）固定3 分钟； 3. 0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次，每次10 分钟； 4. PBS漂洗3 次； 5. 用罗丹明（Rodamine）标记的鬼笔环肽（Phalloidin）（1:10）室温中反应15 分钟； 6. PBS漂洗3 次；

抗管蛋白免疫染色法

1. 细胞培养用支持物细胞培养法，把细胞培养在小盖片上； 2. 漂洗用镊子挟出小盖片，在温PBS中漂洗3 次，每次30 秒； 3. 固定在室温中用PBS配的3 %甲醛液固定20 分钟； 4. 漂洗从固定液中取出，仍用温PBS漂洗3 次，每次1 分钟，最后在滤纸上吸干多余的PBS； 5. 过丙酮投入冷丙酮中（－10 ℃～－20 ℃）

考马斯亮蓝染色法

1. 固定液准备 0.1 M 磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2O） 14.0 ml 0.1 M 磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O） 36.0 ml 蒸馏水 50.9 ml （以上各液相混合后再加戊二醛） 25 %戊二醛 50.0 ml 染色液：甲醇 46.5 ml 冰醋酸 7.0 ml 蒸溜水 46.5 ml