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细胞内过氧化物酶的显示

相关实验:细胞组分的化学反应实验

最新修订时间:

原理

过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。

材料与仪器

小白鼠
PBS缓冲液 丙酮 二甲苯 乙醇 三氯醋酸 固绿 硫酸铜 联苯胺混合液 番红 过碘酸酒精液 Schiff氏酒精液 亚硫酸水 苏木精 Carnoy固定液
光学显微镜 解剖器材 蜡盘 载玻片 吸水纸 染色缸 盖玻片 水浴箱

步骤

一、方法

1.  取小鼠一只,以颈椎脱位法将其处死,迅速剖开其后肢暴露出股骨,将股骨一端斜向剪断,用PBS缓冲液湿润过的注射器针头吸出骨髓一滴滴到载玻片上。

2.  推片,室温晾干。

3.  将涂片放入0.5%硫酸铜中浸30秒~1分钟。

4.  取出涂片直接放入联苯胺混合液中反应6分钟。

5.  清水冲洗,放入1%番红溶液中复染2分钟。

6.  清水冲洗,室温晾干。

7.  镜检或封片后镜检。

二、结果

涂片中可见一些细胞中存在着蓝色或棕色颗粒,为过氧化物酶所在位置。

来源:丁香实验

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