原理
过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。
材料与仪器
小白鼠
PBS缓冲液 丙酮 二甲苯 乙醇 三氯醋酸 固绿 硫酸铜 联苯胺混合液 番红 过碘酸酒精液 Schiff氏酒精液 亚硫酸水 苏木精 Carnoy固定液
光学显微镜 解剖器材 蜡盘 载玻片 吸水纸 染色缸 盖玻片 水浴箱
PBS缓冲液 丙酮 二甲苯 乙醇 三氯醋酸 固绿 硫酸铜 联苯胺混合液 番红 过碘酸酒精液 Schiff氏酒精液 亚硫酸水 苏木精 Carnoy固定液
光学显微镜 解剖器材 蜡盘 载玻片 吸水纸 染色缸 盖玻片 水浴箱
步骤
一、方法
1. 取小鼠一只,以颈椎脱位法将其处死,迅速剖开其后肢暴露出股骨,将股骨一端斜向剪断,用PBS缓冲液湿润过的注射器针头吸出骨髓一滴滴到载玻片上。
2. 推片,室温晾干。
3. 将涂片放入0.5%硫酸铜中浸30秒~1分钟。
4. 取出涂片直接放入联苯胺混合液中反应6分钟。
5. 清水冲洗,放入1%番红溶液中复染2分钟。
6. 清水冲洗,室温晾干。
7. 镜检或封片后镜检。
二、结果
涂片中可见一些细胞中存在着蓝色或棕色颗粒,为过氧化物酶所在位置。
来源:丁香实验