丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

热酚提取法

相关实验:菌脂多糖的制备实验

最新修订时间:

原理

原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也含糖类。经离心后沉淀含细胞残体。

材料与仪器

细菌浓悬液
热酚 盐水
离心机 培养箱 透析膜

步骤

1.   细菌浓悬液用盐水经2500转/分,20分钟离心洗涤一次。

2.   将沉淀的菌混匀于蒸馏水中,放66℃水浴,然后滴加等量的90%热酚溶液(预热至66℃),边加边摇,而后在66℃水浴中搅拌25分钟

3.   在水浴中冷却,于4℃冰箱过夜

4.   以2000转/分离心15分钟

5.   将上层水溶液吸到另一试管中

6.   剩下的酚层及残渣组分可再加上述同量水在热水浴中搅拌30分钟,冷却,离心,取上层水溶液。将两次提的水溶液混合,置透析袋中于生理盐水中透析2天,其间换几次盐水,以除去酚。

7.   透析后的水溶液层经浓缩(如用聚乙二醇在透析袋外层涂抹以除去水分)。即成粗制脂多糖,于冰箱内保存备用。

来源:丁香实验

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序