粗脂肪的定量（Soxhlet提取法）
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一、目的：
学习索氏提取法测定粗脂肪含量的原理及方法。
二、原理：
所谓粗脂肪，是脂肪、游离脂肪酸、蜡、磷脂、固醇及色素等脂溶性物质的总称。
索氏（soxhlet）脂肪提取器为一回馏装置（图2-1），由浸提管、小烧瓶及冷凝管三者连接而成。浸提管两侧分别有虹吸管及通气管，盛有样品的滤纸斗（包）放在浸提管内。溶剂（乙醚）盛于小烧瓶中，加热后，溶剂蒸汽经通气管至冷凝管，冷凝之溶剂滴入浸提管，浸提样品。浸提管内溶剂愈积愈多，当液面达到一定高度，溶剂及溶于溶剂中的粗脂肪即经虹吸管流入小烧瓶。流入小烧瓶的溶剂由于受热而气化，气体至冷凝管又冷凝而滴入浸提管内，如此反复提取回馏，即将样品中的粗脂肪提尽并带到小烧瓶中。最后，将小烧瓶中的溶剂蒸去，烘干，小烧瓶增加之重量，即样品中粗脂肪含量。
三、器材及
试剂
：
1．器材：
①麦麸以及其他动、植物材料。
②滤纸。 ③索氏提取器（一套）。
④分析天平。 ⑤恒温水浴锅
⑥干燥器。 ⑦铁架台。
⑧橡皮管。 ⑨万能夹。
⑩干燥箱。 电吹风。
2．
试剂
：
无水乙醚：市售无水乙醚往往仍有水分，需处理后使用，处理方法如下：
①含水较多的乙醚，可先于乙醚中投入无水氯化钙（约为总体积1/3），1—2天后，过滤，
水浴
蒸馏，收集36℃馏出液。于此馏出液中加适量金属钠
①
（需用压钠机压成钠条或用刀切成薄片），1—2天后蒸馏，收集36℃馏出液，即得无水乙醚。
②水分较少的乙醚，可于每500g乙醚中加入30g—50g无水硫酸钠或金属钠，1—2天后蒸馏，收集36℃馏出液。
四、操作步骤：
1．将洗净的索氏提取器小烧瓶用铅笔在磨口处编号，103—105℃烘2小时
②
，取出，置干燥器内冷却。分析天平称重，并记录之。
2．用分析天平称取干样约2g（准确至小数点后4位。样品需研碎，通过40目筛孔），用滤纸包好
③
，放入浸提管内。
3．于已称重的小烧瓶内倒入1/2—2/3
④
体积的无水乙醚。连接索氏提取器各部分，恒温
水浴
锅加热回馏2—4小时（样品含脂量高的，应适当延长时间）
⑤
。控制水浴温度，每小时回馏3—5次较宜
⑥
。
4．提取完毕，待乙醚完全流入小烧瓶时，取出滤纸包，再回馏一次以洗涤浸提管。继续加热，待浸提管内乙醚液面接近虹吸管上端而未流入小烧瓶前，倒出浸提管中之乙醚。如果小烧瓶中尚留有乙醚，则继续加热蒸发，直到小烧瓶中溶剂基本蒸尽，停止加热，取下小烧瓶，用吹风机将瓶中残留乙醚吹尽
⑦
，再置103—105℃烘箱中烘半小时，取出置干燥器中冷至室温，称重，由小烧瓶增加之重量可计算出样品的脂肪含量。
按同法，用不包样品的滤纸包做空白测定。
测定脂肪后，小烧瓶需先用2%氢氧化钠酒精浸泡，再用肥皂洗净烘干保存。
注意：进行本实验时应切实注意防火，乙醚为易燃品，切忌明火加热，同时要注意提取器各连接处是否漏气，以及冷凝管冷凝效果是否良好，以免大量乙醚蒸气外逸。
附：水 分 测 定
取扁形称量瓶
⑧
2只，洗净，用铅笔在磨口处作好记号，置103—105℃烘箱中烘2小时，移入干燥器内，冷至室温（约10—15分钟），称重（准确于小数点后第4位，下同）。用称过重量的称量瓶，各称取粉碎样品（麦麸）2g，同时于103—105℃烘2小时，取出置干燥器中冷却，称重。如此重复烘烤，直至恒重
⑨
，按下式计算样品的含水量。
注意：
1．烘烤样品时，必须将称量瓶盖子打开，斜搁在称量瓶口上，以免水分不能蒸发，但也不必将盖子取下，否则容易弄脏弄错。
2．冷却和称重时，应将称量瓶盖子盖好，称重要迅速，干燥器中的吸水剂需新鲜，否则将因样品吸收水分，甚至重量反而增加。
3、在整个操作过程中，应保持称量瓶清洁，不能用手直接拿取。
① 金属钠遇水爆炸，应注意。不能用手直接拿取！用后之金属钠条（片），可用二甲苯洗去外层黄色物质，再浸入煤油中并贮于密封容器。
② 空索氏提取器小烧瓶（以及空称量瓶）经103—105℃烘烤2小时即恒重。
③ 滤纸包必须用丝线扎好，保证样品不漏散，最好用特制的滤纸斗，斗口塞以脱脂棉。样品包（斗）放入浸提管后，其高度不能超过乙醚面的最高高度。
④ 装入乙醚之量，应以在回馏过程中小烧瓶内有适量乙醚存在为准，如发现小烧瓶中脂肪颜色变深（似烧焦状），系溶剂太少或温度太高。
⑤用水浴锅加热，但所用之水需清洁（用 蒸馏 水），提取完毕后，如小烧瓶外部沾有污渍，应洗刷干净，再烘烤称重。
⑥ 回馏速度不宜太快，否则样品中脂肪不易浸提完全。太慢则时间不经济。至于提取时间的多寡，与样品用量、脂肪含量及颗粒大小有关，本实验所用样品量及提取时间仅适于测定麦麸。
⑦ 必须将小烧瓶中残留之少量乙醚在通风处赶尽，然后再放入 烘箱 ，否则易发生事故。
⑧ 如用高型 称量瓶 ，样品水分不易烤干应经常翻拌样品，为此可置一小玻棒于瓶内，一并烘烤与称重。用扁型 称量瓶 时，样品也应薄薄地平铺于瓶底，不宜过多。
⑨ 衡量是否恒重的标准，应根据各个实验的有效数字而定，本实验以前后两次重量之差不超过10mg，即可。
