材料与仪器
抗体
磷酸钠缓冲液 MBS 二甲基酰胺 EDTA PBS
分光光度计 离心机
磷酸钠缓冲液 MBS 二甲基酰胺 EDTA PBS
分光光度计 离心机
步骤
1. 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中，置于一个2 ml 的玻璃试管，加50 μl MBS/DMF溶液，于室温下温和搅拌30 min。
2. 加样到PD-10柱子上，上柱前用10 ml 的0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液预平衡柱子。
3. 上样后每0.6 ml 加I为一组分分部收集洗脱液，监测A280并收集第一个蛋白峰。
4. 汇集第一个峰的洗脱液于15 ml 的玻璃试管中。
5. 将10 μmol 的肽溶于20 mmol/l EDTA中，终浓度约为1 mg/ml。
6. 将其加到装有MBS/BSA复合物的玻璃试管中。
7. 于室温下在，氮气中振摇4 h，于4℃对3 l PBS透析过夜。
8. 换PBS后继续透析4 h。
3. 上样后每0.6 ml 加I为一组分分部收集洗脱液，监测A280并收集第一个蛋白峰。
4. 汇集第一个峰的洗脱液于15 ml 的玻璃试管中。
5. 将10 μmol 的肽溶于20 mmol/l EDTA中，终浓度约为1 mg/ml。
6. 将其加到装有MBS/BSA复合物的玻璃试管中。
7. 于室温下在，氮气中振摇4 h，于4℃对3 l PBS透析过夜。
8. 换PBS后继续透析4 h。
9. 将样品独立分装成小份，贮存于-20℃。
来源：丁香实验
