抗肽抗体的制备实验

实验分类：

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

提高免疫原性肽的抗血清，是最简单的方法，获得非隔离的蛋白质的抗体，例如，对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。这种方法也是有用的，当隔离的抗原是困难或费时，或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中，置于一个2 ml 的玻璃试管，加50 μl MBS/DMF溶液，于室温下温和搅拌30 min。 2. 加样到PD-10柱子上，上柱前用10 ml 的0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液预平衡柱子。 3. 上样后每0.6 ml 加I为一组分分部收集洗脱液，监测A280并收集第一个蛋

备选方案

1. 将10 mg 的血蓝蛋白溶于2 ml pH10的硼酸缓冲液中，置于15 ml 的玻璃试管中，温和振摇。 2. 加10 μmol 的合成肽。 3. 缓慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液，于室温下振摇。 4. 使其反应2 h（溶液将变成黄色）。 5. 加0.25 ml 的1 mol/l 甘氨酸以封闭未反应的戊二醛，使其反应30 min。 6. 偶联物对3