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快速银染法

相关实验:蛋白质染色实验

最新修订时间:

材料与仪器

蛋白质
甲醛固定液 硫代硫酸钠 干胶液 甲醇
摇床 透析膜

步骤

1. 将凝胶置于塑料容器中,加入50 ml 甲醛固定液,在旋转摇床中缓慢摇动10 min。
 
2.  倾去固定液,用水冼两次,每次5 min,缓慢摇动。
 
3.  倾去水,凝胶浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸钠溶液中1 min,缓慢摇动。
 
4.  倾去硫代硫酸钠溶液,用水洗凝胶两次,毎次20 s。
 
5.  倾去水,将凝胶浸泡在50 ml 硝酸银中10 min。缓慢摇动。
 
6.  倾去硝酸银溶液,用水洗胶,然后用小量体积的硫代硫酸盐显影液冼。
 
7.  将凝胶浸泡在50 ml 新配制的硫代琉酸盐显影液中,缓慢摇动,直至获得足够的条带显色强度,在下一步停影前继续显影一会儿,或显影到此为止。

8.  每100 ml 硫代硫酸盐显影液加入5 ml 2.3 mol/l 柠檬酸,缓慢摇动10 min。

9.  倾去液体,用水洗凝胶,缓慢摇动10 min。

10.  倾去水,将凝胶浸泡在50 ml 干胶液中10 min。
 
11.  将凝胶放在两张湿润的透析膜之间,夹在玻璃平板中,平板的边缘用夹子夹好,在室温干燥过夜。

来源:丁香实验

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