材料与仪器
哺乳动物细胞
PBS
培养皿 细胞刮子 离心机
PBS
培养皿 细胞刮子 离心机
步骤
1. 用PBS分别洗3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶质粒的细胞。
2. 每只培养皿中加1 ml 提取缓冲液，立即用橡胶刮子刮下细抱，移至1.5 ml 微量离心管中。离心15~30 s，弃上清。
3. 在细胞沉淀中加100 μl 提取缓冲液，经3次冻融裂解细胞膜。
3. 在细胞沉淀中加100 μl 提取缓冲液，经3次冻融裂解细胞膜。
4. 将裂解的细胞在4℃以最大速度离心5 min，移出上清，分析其荧光素酶的活性。
来源：丁香实验
