材料与仪器
转染的细胞
PBS Triton裂解液 β-半乳糖苷酶反应缓冲液 光发射加速液
细胞刮子 绘图仪 发光计 计数器
PBS Triton裂解液 β-半乳糖苷酶反应缓冲液 光发射加速液
细胞刮子 绘图仪 发光计 计数器
步骤
1. 用PBS分别洗涤两次60 mm 培养皿中的转染β-半乳糖苷酶表达质粒的细胞及模拟转染的细胞。
2. 加入250 μl Triton裂解液，用一橡胶细胞刮子将细胞刮下来。将细胞提取物转移至1 个1.5 ml 微量离心管中。在4℃以最大速度离心2 min，将上清转移至一个干净的微量离心管中。
3. 在一只发光计的测试管中加2~20 μl 细胞提取液。再加200 μl β-半乳糖苷酶反应缓冲液，在室温下温育60 min。
4. 将测试管放入发光计中，注人300 μl 光发射加速液。注入后等2~5 s，然后测定5 s。
来源：丁香实验
