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一步法

最新修订时间:

材料与仪器

大肠杆菌
TSS 葡萄糖 LB
离心机 分光光度计 摇床

步骤

1.  按1:100的比例将过夜培养的菌液如人到新鲜的LB培养液中,于37℃培养至为OD600为0.3~0.4。
 
2.  加入等体积的2x SS于菌液中,在冰上温和地混匀。
 
3.  将100 ul 感受恣细菌和1~5 ul DNA加入到一个冰冷的聚丙烯管或玻璃管中,4℃放置5~60 min。

4.  加入0.9 ml 含20 mmol/l 萄糖的LB培养液,37℃温和振荡培养30~60 min 在合适的平扳上挑选转化体。

来源:丁香实验

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