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简介
了解ATP酶在植物代谢过程中的作用,掌握ATP酶活力测定的原理和方法。
原理
ATP酶(adenosine triphosphatase)可催化ATP水解生成ADP及无机磷,这一反应放出大量能量,以供生物体进行各需能生命过程。它存在于生物细胞的多个部位,如细胞质膜上、叶绿体类囊体膜上,对整个生命的维持有着重要的作用。在生物学研究中,常通过测定酶促反应释放的无机磷量或ATP的减少量以及pH变化等来测定ATP酶的活力。
本实验通过测酶促反应过程中无机磷的释放量来测定叶绿体偶联因子ATPase的活力。偶联因子是分布在叶绿体类囊体膜表面的一种复合蛋白,它在光合作用能量转换反应中起重要作用。
在正常情况下,膜上的偶联因子催化光合磷酸化反应(ATP合成)的速率很高,而水解ATP的活力是十分低的,但用二硫苏糖醇(DTT)、胰蛋白酶或较高温度等激活后。它水解ATP的活力可大大增加。因此,偶联因子的测定常用激活后的ATPase水解ATP的活力来表示。
来源:丁香实验团队
操作方法
了解ATP酶在植物代谢过程中的作用,掌握ATP酶活力测定的原理和方法。