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动脉的基因转移实验

实验分类:

遗传学实验

最新修订时间:

简介

利用这一单元的操作方案,可采用外科手术的方法直接将载体(病毒或非病毒)或已转导基因的内皮细胞或平滑肌细胞注入到正常的或已损伤的动脉中。选择动脉基因转移需要考虑:动物种类的选择、动脉的位置、载体(包括调控序列)、手术方法的选择以及选择损伤的动脉还是没有损伤的动脉。在本节所介绍的方法适合于病毒和非病毒载体的转移;第一个操作方案能用于转移已稳定转染了基因的内皮细胞和平滑肌细胞。

来源:丁香实验

操作方法

基本方案1 通过手术将基因转移到猪的动脉

1.在手术前 2 天,给幼年家猪按 10mg/kg 体重的剂量服用阿斯匹林,并且在整个研究过程中每周一次连续服用 3 次。 2.按每公斤 6.0 mg Teiazol 和 2.2 mg 甲苯噻嗪(Xylazine) 的量给家猪进行肌肉注射来麻醉,然后插人一根导管,用异氟烷(isofhrane) 来麻醉,直到整个手术完成。 3.将实验用的家猪准备好,然后用一块布将其盖住,划一条中位线,从它的腹部

基本方案2 通过手术将基因转移到猪的髂骨动脉

1.和基本方案 1 的第 1~6 步一样将猪的血管分开。 2.通过支架插入一个 3.5 mm 的硝酸纤维素材料的带有支架的可促使血管球的导管,渐渐地后退以促使它接近大腿骨的的动脉(图 13.1.2)。然后用 8 个大气压的压力扩张 30s。 3.插入一对囊装导管在血管的支架上面,移到两个球囊跨过受伤的血管的地方的中部。 球囊和动脉的比例为 1.1:1

基本方案3 通过手术将基因转移到兔子的动脉粥样硬化的动脉

1.在手术前 2 天,给白色的新西兰兔按 10mg/kg 体重的剂量服用阿司匹林,并且在整个研究过程中每周一次连续服用 3 次。 2.按每千克 13 mg 氯胺酮和 5 mg 的甲苯噻嗪(xyiazine) 量给兔子进行肌肉注射以麻醉,然后插入一根导管,用 1% 异氟焼(isoflurane) 来麻醉,直到整个手术完成。 3.通过手术使兔子的膝盖以上,股骨以下的部位暴露。把尾部用 2-0 的丝

基本方案4 用外科方法将基因转入到颈动脉

1.用 25 G 的注射器通过肌肉注射麻醉一只成年的 C57B1/6 小鼠,每千克 80 mg 氯胺酮和 12 mg 甲苯噻嗪。准备好将小鼠盖上布单,将小鼠仰卧放置在显微切割显微镜下确保能看得足够清楚。 2.在前部靠颈部的正中位置做一条线,用一把 15 号的手术刀从环状软骨切开一直切到垂管。切开 strap 肌肉并用 Agricola 显微切割拉伸机横向拉开。通过这样的切割,用钝

基本方案5 用外科方法将基因注射到受伤小鼠股动脉

1.按每千克 IOOU 量的药物通过尾部静脉注射给 8 个星期大的 C57B1/6 小鼠。体重每千克 5 mg 的甲苯噻嗪和体重每公斤 80 mg 的氯胺酮麻醉小鼠。将一个 37°C 的温暖的盘子放到解剖显微镜下,并将老鼠仰放在盘子上,用胶带将其四肢固定。 2.在大腿的前外侧纵向剪开,. 使左侧的股动脉和隐动脉露出。在隐动脉导入一根可弯曲的导管然后穿透到股动脉约 I.5 cm 处(图 13.1.

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