基本方案5 用外科方法将基因注射到受伤小鼠股动脉

8个星期大的 C57B1 6 小鼠
肝素 甲苯噻嗪 氯胺酮 重组病毒或非病毒载体溶液
培养板 解剖显微镜 标准外科设备 导线 皮肤用U形针

1.按每千克 IOOU 量的药物通过尾部静脉注射给 8 个星期大的 C57B1/6 小鼠。体重每千克 5 mg 的甲苯噻嗪和体重每公斤 80 mg 的氯胺酮麻醉小鼠。将一个 37°C 的温暖的盘子放到解剖显微镜下，并将老鼠仰放在盘子上，用胶带将其四肢固定。

2.在大腿的前外侧纵向剪开，. 使左侧的股动脉和隐动脉露出。在隐动脉导入一根可弯曲的导管然后穿透到股动脉约 I.5 cm 处（图 13.1.4)。

3.旋转并将线通过血管 3 次，然后将其去除。插入一根里面装有病毒或非病毒载体溶液的塑料管到损伤的动脉中。用一个 6-0 丝结暂时封闭股动脉近心端。

4.用 10U/ml 的肝素冲洗伤口端然后用 6-0丝结将静脉远端打结。

5.用一个自动注射装置通过塑料管注射 0.3 ml 载体溶液，注射 15 mm，在注射过程中用一个压力感应器调节压力在 100~150 mmHg。

6.松开近端的结让血液流动。拿走塑料管在远端打结。检查动脉血是否流动。U 形针关闭。

7.在手术后的一天通过尾部静脉注射按每公斤体重 100U 给药。