基本方案1 通过手术将基因转移到猪的动脉

幼年家猪性别任意 病毒或非病毒的包含编码重组基因的载体
阿斯匹林 Telazol 甲苯噻嗪 异氟烷 无菌的磷酸盐缓冲溶液
导管（适合猪用的）和器械 标准的手术器械 Balfour牵引器 丝带 两个气囊导管 压力牵引器 血液动力监护仪 可吸收的缝线 皮肤锁环

1.在手术前 2 天，给幼年家猪按 10mg/kg 体重的剂量服用阿斯匹林，并且在整个研究过程中每周一次连续服用 3 次。

2.按每公斤 6.0 mg Teiazol 和 2.2 mg 甲苯噻嗪（Xylazine) 的量给家猪进行肌肉注射来麻醉，然后插人一根导管，用异氟烷（isofhrane) 来麻醉，直到整个手术完成。

3.将实验用的家猪准备好，然后用一块布将其盖住，划一条中位线，从它的腹部切开，一直延伸到耻骨。就这样，把猪的表皮和筋膜沿中线切开了。如果是母猪的话，要避免切到它的尿道。从中打开一个空洞，小心地使用牵引器将它的肠放入体内。

4.用各种各样的器械，将从其头盖骨附近到大腿骨的的动脉血管分离出来。小心地将血管附近的淋巴和附近黏附的组织分开。从水平的角度将血管分离，以避免切到旁边的支血管。

5.小心分离后，用 2-0 的丝线将分支血管绑好。如果不这样的话，会降低血管中的血压，以至于影响到基因的转移。

6.把髂骨的尾部用 2-0 的丝绳绑好，用一把精致的剪刀在髂骨的动脉切一个口子，小心地用剪刀将血管扩张，插入一对气囊导管（图 13.1.1)。

>第 7~9 步是为了诱导血管手术的进行，如果是转基因到普通的血管，直接跳到第 10 步

7.通过目视镜，进一步地将导管接近气囊的尾部。这个操作需要通过微小的牵引将导管变直。


8.把管内无菌 PBS 装在压力转换器中，将它的压力调为0并且与球的尾部相连接。按 lcc/1~5 min 的速率在球中不断地充气（缓慢的充气是为了保护受伤的地方。这时压力表的压力大约为 500 mmHg。

9.导管的中部，两个气囊跨过受伤的血管的地方，将导管慢慢地缩小。

10.在气囊的尾部充人 1cc 的空气，加人 3~5 ml 的无菌 PBS，将血液冲走。

11.在导管（0.8 ml) 中加满病毒或非病毒的载体液体或者转入基因的细胞混悬液。

12.在气囊中充入 Iml 的空气。

13.在两个气囊之间（0.1~0.3 ml) 血管的伤口处的区域滴满悬液，测量滴入时的压力，不要超过 150 mmHg(猪的血压是 901 mmHg)。整个滴入过程为 20 min，其间要控制住压力。

14.从近到远，对气囊放气。把导管移开，并用 2-0 的丝绳绑好髂骨的动脉。确保血液的流动正常。

15.用 1-0 可吸收的缝线将猪的血管和肌肉缝合，再将筋膜缝合，最后将表皮缝合。