免疫荧光组织化学直接法

实验分类：

形态学与生理生化

最新修订时间：2022-02-10

简介

免疫荧光组织（细胞）化学染色方法——直接法，是一种荧光抗体染色法。

原理

用荧光素标记已知特异性抗体，直接与组织细胞中相应抗原结合，在荧光显微镜下可见抗原存在部位呈现特异性荧光。

应用

适合检测浓度较高的蛋白质抗原，如肾脏、皮肤抗原的检查。在临床上也常用于细菌、螺旋体、原虫及真菌的检测

来源：丁香实验

操作方法

检查抗原法；检查抗体法

1．染色切片经固定后，滴加经稀释至染色效价的荧光标记特异性抗体，置人湿盒内，室温或37~C染色30分钟。2．洗片洗去存留的荧光抗体，将切片浸入pH 7．2～7．4的PBS中振荡或摇动洗涤2次，每次5分钟，再用蒸馏水洗1分钟，除去盐结晶。3．封固和观察用50％甘油缓冲液(pH 9．0～9．5的0．5mol／L磷酸盐缓冲液配置)封固或用抗淬灭剂封固后，置荧光显微镜下观察。