脐血来源多能祖细胞（CB-MNCs）的冻存与复苏实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

来源：《人干细胞培养》

来源：丁香实验

操作方法

CB-MNCs冻存

(a)准备冻存液：90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却，至少30min。(b)CB-MNCs细胞计数。(c)用冷的冻存液重悬细胞，调整细胞浓度为（5〜l0) ×106活细胞/mL。(d)按1mL/冻存管分装。(e)立即将冻存管放入慢速冷冻盒，置于-70℃冰箱4〜24h。或者将冻存管放入液氮的控速降温仪中。(f)4〜24h后，将置于-70℃冰箱或控速降温仪中的冻存管放入耐液氮储存盒，将

CB-MNCs的复苏

(a)将装有CB-MNCs的冻存管移入37℃水浴中。(b)先擦干冻存管，然后用70%酒精擦拭冻存管防止污染，打开冻存管。(C)迅速将细胞悬液（大约1mL)转移到装有1OmL预冷的10%FBS培养基的15mL离心管中。(d)室温200g离心10min。(e)倒掉上清，不搅动离心沉淀的细胞团。(f)用10mL PBSA洗一次，室温20g离心10 min。(g)根据实验目的，用合适的培养基重悬CB-MN