原理
材料与仪器
CB-MNCs
FBS 二甲基亚砜(DMSO)
冻存管 慢速冷冻盒(如Mr.Frosty程序降温盒)或控速降温仪 耐液氮储存盒
FBS 二甲基亚砜(DMSO)
冻存管 慢速冷冻盒(如Mr.Frosty程序降温盒)或控速降温仪 耐液氮储存盒
步骤
(a)准备冻存液:90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却,至少30min。
(b)CB-MNCs细胞计数。
(c)用冷的冻存液重悬细胞,调整细胞浓度为(5〜l0) ×106活细胞/mL。
(d)按1mL/冻存管分装。
(e)立即将冻存管放入慢速冷冻盒,置于-70℃冰箱4〜24h。或者将冻存管放入液氮的控速降温仪中。
(f)4〜24h后,将置于-70℃冰箱或控速降温仪中的冻存管放入耐液氮储存盒,将此盒放入液氮罐的气相(大约-135℃)或液相(大约-196℃)中。
来源:丁香实验