Northern 印迹和总 RNA 杂交实验

1. 用肥皂和水彻底清洗凝胶模，梳齿和凝胶用具。 2. 准备甲醛凝胶溶液。 甲醛凝胶溶液（300 ml 1％ 琼脂糖凝胶）： 琼脂糖，3.0 g 10x RNA 电泳缓冲液，30 ml Milli-Q 或用玻璃器皿蒸馏过的水，222 ml 37% 甲醛，48 ml 加热熔解琼脂糖。冷却到 55℃（用温度计检査）后加甲醛。在通风橱中倒胶。 10x RNA 电泳缓冲液（配 500 m

1. 滤膜进行 1~2 小时预杂交。 在 42℃： 50% 甲酰胺 5x SSPE 2 x Denhardt 试剂 0.1% SDS 或者在 68℃： 6x SSC 2x Denhardt 试剂 0.1% SDS 2. 把已变性了的放射性标记探针直接加到预杂交液中。为了探测到低丰度的 mRNA，至少使用 0.1 μg 比活超过 2x108 cpm/μg 的探针。在合适的温度下继