最新修订时间:
简介
本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。
来源:丁香实验
操作方法
1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿,吸出培养液,加 2 ml RNA 提取缓冲液,用橡胶刮棒刮下细胞。 RNA 提取缓冲液: 变性液,20 ml β-巯基乙醇,0.144 ml 2 mol/L 乙酸钠,pH 4,2 ml 水饱和酚,22 ml 可避光保存在 4℃ 2~3 个月。 变性液: 4 mol/L 硫氰酸胍:250 g 硫氰酸胍 25 mmol/L 柠檬酸
从组织中纯化总RNA1. 从动物取下组织,直接进行第 2 步或在液氮中快速冷冻新鲜解剖的组织。冷冻后的组织可以贮存在 -70℃。 2. 组织(0.05~0.3 g)在 2.0 ml RNA 抽提缓冲液中匀浆。 3. 每管加 200 μl 氯仿,混合均匀,冰浴 15 分钟。 4. 接下去的步骤和“从培养的细胞中纯化总RNA”方法步骤 4 以下的步骤相同。