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简介
来源:丁香实验
操作方法
组织制备 1. 切碎组织,用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗组织/组织培养物: 溶液 H: 15 mmol/L PIPES,pH 7.2 80 mmol/L KCl 15 mmol/L NaCI 0.5 mmol/L 精咪 0.2 mmol/L 精胺 1 mmol/L DTT 1 mmol/L PMSF 细胞匀浆 2. 清洗后,在二倍体积的含 250 mmol
爪蟾卵母细胞卵母细胞收集和制备 1. 从成熟的雌性非洲爪蟾取整个或部分卵巢,在含 88 mmol/L NaCl,1 mmol/L KCl,0.9 mmol/L MgSO4,0.33 mmol/L Ca(NO3)2,0.41 mmol/L CaCl2,2.4 mmol/L NaHCO3,10 μg/ml 苯青霉素,10 μg/ml 硫酸链霉素和 10 mmol/L Na-HEPES,pH 7.6 的溶液中 1
果蝇胚胚收集和制备 1. 可用任一种方法收集果蝇胚(Oregon R P2 或任何其他的野生系)。 制备匀浆 2. 直接在 9 倍体积的抽提缓冲液(溶液 E ) 中融化冻存胚。 溶液 E: 250 mmol/L 蔗糖 50 mmol/L NaCl 50 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.5),( 25℃) 5 mmol/L MgCl2 1 mmol/L PMSF 1 mm
SPISULA卵母细胞收集和制备 1. 从成年海蚌中剥离卵巢和卵母细胞。然后在 1 g 重力作用下,用经 0.22 μm Millipore 滤器过滤的海水清冼几次卵母细胞。 匀浆 2. 为了在不激活卵母细胞的情况下使卵黄膜去稳定,将洗过的卵母细胞悬浮于含 1.4 mol/L 甘油,15 mmol/L NaHPO4,pH 8.0,和 40 μg/ml 五羟黄酮的溶液中,室温孵育 8 分钟。 3. 500
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