靶蛋白的放射标记实验

1. 制备活跃生长着的细胞。从单层培养细胞（约铺满 75% 表面积）中吸去培养基。用预热至 37℃ 的无血清培养基冲洗两次（培养基中应该不含蛋氨酸和半胱氨酸）。对于悬浮培养细胞，通过 400 g 离心 5 分钟收集细胞。用顶热至 37℃ 的无蛋氨酸培养基重悬沉淀，400 g 离心 5 分钟。尽可能地去掉上清，用无蛋氨酸培养基重悬细胞至 107 细胞/ml 后转移至一块小培养板。 2. 加入预热的

1. 接种细胞于只含有必需氨基酸和辅因子的已知成分的基本培养基，于合适温度中度振荡培养过夜。 2. 用新鲜的基本培养基稀释培养物，继续温育至 107 细胞/ml （酵母）或对数期中期（细菌）。 3. 5000 g 室温离心 10 分钟收集细胞，用无硫酸盐基本培养基重悬至 107 细胞/ml（酵母）或 5X108 细胞/ml（细菌）。 4. 加 H235SO4 至终浓度 20 μCi/ml。于