肿瘤细胞原代培养实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

肿瘤细胞原代培养可以：（1）研究癌变机理；（2）研究抗癌药检测；（3）研究癌分子生物学；（4）用于阐明和解决癌症。

来源：丁香实验

操作方法

组织块法

一、将取得的瘤组织去除脂肪、结缔组织及坏死部分。二、在平皿中用Hanks液洗3次，剪碎组织，切成1-2 mm3 小块。三、接种于培养瓶（或皿）中，37℃、5%CO2 或加盖并塞在普通恒温箱中培养。

酶消化法

一、剪碎组织，切成1-2 mm3 小块中，加入0.25%胰蛋白酶或2 000 U/ml胶原酶。二、在37℃水浴中消化30min或更长一些，去除消化液，用洗液洗3次，培养基洗1次后，用完全培养基悬浮，并用吸管吹打分散制成细胞悬液，计数。三、以（5-10）x108 个/L细胞浓度，在含有10%小牛血清的RPMI、EagleMEM或DMEM中，在37℃、5%CO2 下分瓶（或皿）中培养。

脱落细胞法

一、将新鲜的肿瘤组织去除脂肪和结缔组织。二、洗液洗2次后，用刀片将肿瘤组织切成细薄片。三、在切割的同时有许多上皮细胞脱落下来，脱落细胞经洗涤后，加入完全培养基，便可获得较纯的上层细胞。四、于培养瓶（或皿）中，37℃、5%CO2 下培养，每隔2-3天换液一次，7-10天上皮细胞逐渐长成单层。