细菌芽孢染色实验

实验分类：

微生物实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

芽孢又叫内生孢子（endospore)，是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，通常呈圆形或椭圆形。细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢囊内的位置。芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。

由于芽孢壁厚、透性低、不易着色。当用石炭酸复红。结晶紫等进行单染色时，菌体和芽孢囊着色。而芽孢囊内的芽孢不着色或仅显很淡的颜色，游离的芽孢呈淡红或淡蓝紫色的圆或椭圆形的圈。为了使芽孢着色便于观察，可用芽孢染色法。

来源：《微生物学实验（第三版）》

来源：丁香实验

操作方法

改良的Schaeffer-Fulton 氏染色法

1. 制备菌悬液加 1～2 滴水于小试管中，用接种环挑取 2～3 环菌苔于试管中。搅拌均匀，制成浓的菌悬液。2. 染色加孔雀绿染液 2～3 滴于小试管中，井使其与菌液混合均匀，然后将试管置于沸水浴的烧杯中，加热染色 15～20 min。3. 涂片固定用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上，涂成薄膜，然后将涂片通过火焰 3 次温热固定。4. 脱色水洗，直至流出的水无绿色为止。5. 复染用番红染液

Schaeffer- Fulton 氏染色法

1. 制片按常规涂片、干燥、固定。2. 染色加数滴孔雀绿染液于涂片上，用木夹夹住载玻片一端，在微火上加热至染料冒蒸气并开始计时，维持 5 min。3. 水洗待玻片冷却后，用缓流自来水冲洗，直至流出的水无色为止。4. 复染用番红染液复染 2 min。5. 水洗用缓流水洗后，吸干。6. 镜检干后油镜观察。芽孢呈绿色，芽孢囊及营养体为红色。