葡萄膜炎动物模型

实验动物

别名：

Animal models of experimental autoimmune uveoretinitis

最新修订时间：2022-02-10

简介

葡萄膜炎动物模型，英文名是 Animal models of experimental autoimmune uveoretinitis。目前，用于葡萄膜炎动物模型的方法主要有 2 种：IRBP 视网膜抗原诱导葡萄膜炎动物模型法和过继转移诱导葡萄膜炎动物模型法。

葡萄膜炎是一组累及葡萄膜，视网膜、视网膜血管及玻璃体的炎症性疾病，多发生于青壮年，易反复发作，治疗棘手，常因不可逆转的并发症而导致患者视力下降甚至盲目。据报道，在西方国家盲目者中，由葡萄膜炎所致的盲目者占 10%～15%，其中在美国至少有 200 万葡萄膜炎患者，在我国葡萄膜炎在致盲眼病中占第 4-7 位。由此可见，葡萄膜炎是一类严重危害人类健康的常见致盲眼病。

原理

实验性自身免疫性葡萄膜炎（experimental autoimmune uveoretinitis，EAU）是一种器官特异性的、T 细胞介导的自身免疫性疾病，可由弗氏完全佐剂（complete Freund adjuvant，CFA，一种添加了热灭活结核杆菌的矿物油）乳化的视网膜抗原免疫多种哺乳动物所得，也可将视网膜特异抗原化的 T 细胞或树突状细胞（dendritic cells，DCs）过继转移至天然鼠所得，是研究人类葡萄膜炎的经典动物模型。

多种视网抗原，如视网膜抑制蛋白（可溶性抗原），视网膜 S 抗原、光感受器维生素 A 类结合蛋白（interphotoreceptor retinoid-binding protein，IRBP）均可诱导出 EAU，且诱导的 EAU 发生的免疫机制近似，其中由 IRBP 诱导小鼠的葡萄膜炎动物模型（animal model of experimental autoimmune uveoretinitis）是最为经典和最为广泛使用的实验性葡萄膜炎动物模型。

应用

葡萄膜炎的发病原因及机制十分复杂，已报道的病因和类型已达 100 余种，外伤、感染，自身免疫、手术等均可引起葡萄膜炎，其中以自身免疫反应引起的最为常见。

来源：丁香实验团队

操作方法

IRBP视网膜抗原诱导葡萄膜炎动物模型法

取 1 mg/ml 的 IRBP 溶液与 CFA 按 1:3 比例混合，待充分混匀制成乳剂后，取 200 ul 分别免疫 B10.RⅢ小鼠双足部皮下，然后经腹腔注射 0.01 ug/ul 百日咳毒素（pertussis toxin，PTX）100 pul。免疫后第 7 天至 28 天隔日进行临床裂隙灯显微镜眼前段检查和直接检眼镜眼底部检查，大体观察评价小鼠眼组织临床表现和炎症的严重程度。在免疫小

过继转移诱导葡萄膜炎动物模型法

DCs 诱导方法建立 EAU 模型。分离 7 天龄的 B10.RⅢ 鼠脾脏单个细胞，红细胞裂解液裂解红细胞后，加人 Fc 阻断抗体孵育以阻断 Fc 的干扰，然后应用抗 CDIIc+ 免疫磁珠阳性筛选并纯化 CDIIc + 细胞，使之纯度达 99% 以上，将纯化的 CDIIc+ 细胞应用 100ug/ml 的 IRBP161-180 抗原肽联合 1ug/ml 的 LPS 诱导 DC 成熟。最后，取诱