斑马鱼遗传修饰技术

实验动物

别名：

Gene-modified technology for Zebrafish

最新修订时间：2022-02-10

简介

斑马鱼遗传修饰技术，是像线虫、果蝇一样，显微注射 mRNA 和 Morpholino，进行基因过量表达或下调表达，使用反向遗传学研究策略如 ZFNs、TALENs 等进行遗传学研究。目前用于斑马鱼遗传修饰技术得到方法主要有 3 种：Morpholino 修饰斑马鱼基因、显微注射质粒 DNA 技术修饰斑马鱼基因、Tol2 转座子介导基因转移技术修饰斑马鱼基因。

原理

Morpholino 修饰斑马鱼基因的基本原理是利用吗琳环（Morpholino， MO）与核糖核苷酸中五元碳环的结构类似性、人工合成针对特异基因的 MO，可以达到抑制其 mRNA 翻译出功能蛋白的效果。Morpholino oligos 可以使基因表达沉默，修饰基因的剪接或者阻止 miRNA 的成熟及活性。Morpholinos 并不降解其靶向 RNA，而是在与靶序列结合后，以一种 RNA 酶非依赖的空间位阻效应来发挥作用。

来源：丁香实验团队

操作方法

Morpholino修饰斑马鱼基因

Morpholino 修饰斑马鱼基因，是使基因表达沉默，修饰基因的剪接，或者阻止 miRNA 的成熟及活性。Morpholinos 并不降解其靶向 RNA，而是在与靶序列结合后，以一种 RNA 酶依赖的空间位阻效应来发挥作用。

显微注射质粒DNA技术修饰斑马鱼基因

显微注射质粒DNA技术修饰斑马鱼基因，是通过使用组织特异性的启动子以及荧光标记基因，综合斑马鱼胚胎的诸多优势，特别是早期发育通体透明，易于观察的特点，获得转基因斑马鱼。

Tol2转座子介导基因转移技术修饰斑马鱼基因

Tol2 转座子介导基因转移技术修饰斑马鱼基因，是使用在青鳉鱼中发现的 Tol2 转座子获取转基因斑马鱼。