组织染色方法实验

一、固定 1.按照第一章例 2 的方法进行全身灌注，但换用甲醛盐水（在 0.85% 盐水中含 4% 甲醛).3 2.取脑，储存于新鲜的甲醛盐水中。 3.用单面刹刀手工切约 2 mm 厚的冠状切片。 二、脱水和包理 1.梯度乙醇脱水（70%、95% 和 100%)，每 4 h 换 3 次，在组织清洁剂（nationaldiagnostics) 中每 4 h 换 3 次，或直

一、染料注射 用 1ul 的汉密尔顿注射器将固蓝和联氨黄各 30nl 注射入同侧黑质的不同位点（固蓝染细胞浆，联氨黄逆行标记神经元的核，存活时间为 22 h，以限制联氨黄弥散入神经元胞质或周围的胶质细胞)。 二、麻醉和固定 三、切片和显微镜 四、结果 在同侧黑质不同的位点双标显示纹状黑质投射的局部解剖图，纹状体吻尾侧和内外侧的空

步骤 结果 在浦肯野细胞的胞体和树突中发现过氧化物酶反应产物，对称地分布在中线两侧的一些第 7 矢状带, 其余的浦肯野细胞没有着色^在不同的个体，侧矢状带的细节具有高度可重复性，随后发现侧矢状的排列正好以一种适合、互补或重叠的方式与小脑皮层和与其联系中的一些其他的结构、功能和生化分区相对应（Hawkes and Gravel1991)。

步骤 此方法源自 Barker 和 Ip(1963)。 一、固定 在新配制的含水合三氯乙醛 lg、95% 乙醇 45 ml、蒸馏水 50 ml 和浓硝酸 ImI 的溶液中放 5d。 二、冲洗 在流水中放 24 h。 三、碱化 在含 95% 乙醇 25 ml、巴斯德移液管 1 滴氨水（比重 0.88, 约 35%w/w) 中放 24