原理
在本例研究中，仅考察 Gerfen 的同步双重荧光标记所绘制的纹状黑质通路的空间分布，使用固蓝和联氨黄（diamidinoyellow) 的逆行运输. 另外，Gerfen 还使用了被卵白素-生物素免疫酶技术证实的 PHA-L 和被放射自显影证实的 [3 H] 脯氨酸和 [3 H] 亮氨酸混合物的顺行运输，用固蓝的逆行荧光追踪与间接免疫荧光技术相结合，证实在纹状体中各种神经肽的存在。这些方法详见 Gerfen(1985)。
材料与仪器
成年大鼠大脑
步骤
一、染料注射
用 1ul 的汉密尔顿注射器将固蓝和联氨黄各 30nl 注射入同侧黑质的不同位点（固蓝染细胞浆，联氨黄逆行标记神经元的核，存活时间为 22 h，以限制联氨黄弥散入神经元胞质或周围的胶质细胞)。
二、麻醉和固定
三、切片和显微镜
四、结果
在同侧黑质不同的位点双标显示纹状黑质投射的局部解剖图，纹状体吻尾侧和内外侧的空间分布成分被转换到黑质的内外侧分布（图 15-3)。然而，图中的成分是近似或界限不清的，因为相对分开的注射点导致纹状体染色细胞有重叠区域（图 15-3B，B’)。
来源：丁香实验
