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免疫细胞化学的衍生技术

实验分类:

免疫学实验

最新修订时间:

简介

免疫细胞化学的衍生技术,是免疫细胞化学技术的原理,衍生出各种研究抗原表达特性的方法。目前,用于免疫细胞化学的衍生技术的方法主要有2种:免疫酶染色卵白素-生物素-酶复合物染色法和免疫酶染色碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法。

原理

根据实验方法不同,对应的原理也有所不同:

免疫酶染色卵白素-生物素-酶复合物染色法的基本原理是生物素化的一抗检测细胞表达的抗原,再加入酶或荧光素标记的链霉亲和素或亲和素进行检测。

免疫酶染色碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法的基本原理是是 APAAP 复合物是碱性磷酸酶(AP)与抗碱性磷酸酶抗体(AAP)结合而成的免疫复合物,作为显示检测抗体(一抗)的标记物。APAAP 法要求检测抗体(一抗)与抗碱性磷酸酶抗体(AAP)具有相同的 Fc 段,例如均为鼠 IgG 抗体。用兔抗鼠 IgG 抗体(二抗)起搭桥作用,其中一个 Fab 段与一抗结合,另一个 Fab 段连接 APAAP 复合物中的 AAP 结合,通过 APAAP 复合物中的 AP 催化底物显色来对抗原分子进行定性和定位。图解示意【4-5】。


来源:丁香实验团队

操作方法

免疫酶染色卵白素-生物素-酶复合物染色法

免疫酶染色卵白素-生物素-酶复合物染色法,也称 ABC 法,是常用的标记和检测系统,也可以应用于免疫细胞化学技术。

免疫酶染色碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色

免疫酶染色碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法,也称 APAAP 法,是一种间接免疫染色的衍生技术。

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