B细胞增殖的检测

BrdU检测法检测B细胞增殖的基本原理是利用BrdU是DNA前体胸腺嘧啶核苷类似物，通过竞争掺入S期细胞单链DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶。

增殖期的细胞需要大量核苷酸，因此可以吸收加入到培养液中的BrdU，进而固定与BrdU结合的细胞，用相应的抗体（抗-BrdU-POD）与细胞上的BrdUFab段特异性结合后。

可以使发光底物显色，应用荧光化学发光分析仪检测发光强度即可判定细胞增殖水平，也可应用荧光素标记抗体，流式细胞术进行检测。

荧光染料CFSE染色法检测B细胞增殖的基本原理是利用CFSE是一种对细胞无毒副作用的脂类物质，可以穿过细胞膜与细胞骨架蛋白稳定结合，在胞质内某些酶的作用下水解而发荧光。

它可以被488 nm的激光所激发，发射波长为510～530 nm，近似于FITC。理论上认为，当细胞分裂时，CFSE被平均分到两个子细胞当中，因此子细胞所带的荧光量为母细胞的一半。

细胞分裂次数越多，细胞的荧光量越弱。利用FACS技术，将抗体标记与CFSE染色结合，可以测定特定细胞的增殖情况。

3H-TdR掺入法检测B细胞增殖的基本原理是淋巴细胞经有丝分裂原激活后，进入细胞周期进行有丝分裂。

当细胞进入S期后，细胞合成DNA明显增加，DNA合成需要大量的核苷酸，在培养液中加入3H标记的DNA合成原料胸腺嘧啶脱氧核苷（H-TdR），则3H-TdR作为合成的DNA原料被摄入细胞，掺入新合成的DNA中，根据放射性核素掺入细胞的量可以推测淋巴细胞增殖情况。