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特殊蛋白质的分离纯化

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

特殊蛋白质的分离纯化是在要弃除非蛋白质物质成分后,利用不同蛋白质之间的差异性将目的蛋白提纯出来。充分了解目的蛋白的来源、理化特性以及纯化目的,有助于选择合理的分离纯化方法,达到事半功倍的效果。

原理

特殊蛋白质的分离纯化的基本原理是在要弃除非蛋白质物质成分后,利用不同蛋白质之间的差异性将目的蛋白提纯出来。需要充分了解目的蛋白的来源、理化特性以及纯化目的,来选择合理的分离纯化方法。

来源:丁香实验团队

操作方法

包含体蛋白质的提取和纯化

在利用大肠埃希菌表达重组蛋白时,经常会得到包含体。包含体分离纯化难度大,只有在变性后才能形成可溶性的形式予以纯化。纯化后的变性蛋白质需要重新复性(renaturation),才能折叠成正确的天然构象和恢复原有的生物活性。

膜蛋白的提取和纯化

膜蛋白在生物进程中具有关键性的作用。它们参与细胞与细胞之间、细胞与细胞基质之间的相互联系胞器及细胞的形成过程,各种离子、代谢产物和蛋白质的跨质膜运输、RNA 的跨核膜运输等。鉴于膜蛋白在多种细胞功能中的重要性,目前针对各种疾病的药物约有 50% 都以其为靶点。膜蛋白嵌在细胞膜中,水溶性不好,因此,分离和纯化膜蛋白的方法也有所不同。

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