用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

来源：《蛋白质与蛋白质组学实验指南》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

① 将1X107〜5X107个细胞加到1ml含有100mmol/L DDT的Laemmli样品缓冲液中。②由于DNA的释放，在Laemmli缓冲液中细胞裂解液变得很黏，克服黏性问题有2种方法：a．离心裂解液100000g，20min，除去DNA;b.超声破碎裂解细胞，每次超声15〜30s，共4次，每次之间将样品在冰上放置15s。③在95℃水浴加热样品5min。④20000g离心5min.⑤转移上清