z流沙z
有可能会降解一些,但如果全程都在冰上应该还好
balalaLy
PMSF可加可不加,建议额外加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂
loveliufudan
如果在细胞裂解过程中没有加入PMSF,那么存在一定的可能性蛋白质会被蛋白酶降解,尤其是在含有蛋白酶的细胞类型中,如胃腺细胞或胰腺细胞等。
在裂解15min后补加PMSF,虽然可以起到保护蛋白质的作用,但已经有一部分蛋白质可能已经被蛋白酶降解。因此,为了尽量保持样品中的蛋白质完整性和活性,最好在裂解液中最开始就加入PMSF,并在整个裂解过程中保持其作用。
毛利小五郎的徒弟
不会,但是有可能裂解不充分,可以增加裂解时间