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简介
数字PCR (digital PCR)是将传统PCR的指数倍信号转换成线性的数字信号,通过特定的 仪器读值,并利用统计学方法来分析PCR产物。
目前用于数字PCR的方法主要有1种:普通数字 PCR。
原理
数字PCR的基本原理是通过将一个样本分成上百或上千份,使每个反应槽中尽可能只包含一个拷贝的目标分子(即模板),然后在每个槽中都加入荧光标记过的 探针和DNA聚合酶,批量扩增DNA样本,最后通过荧光信号的读值来反映目标分子的PCR扩 增。
数字PCR的出现显著提高了生命科学研究的效率,使生物学家可以快速、高通量检测病人 样本中致病基因的许多变化,包括基因突变、等位基因不平衡的识别等。
应用
数字PCR常用应用领域如下:检测肿瘤组织或DNA样品中的位点突变和等位基因不平衡。
来源:丁香实验团队
操作方法
数字 PCR 即 Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于 qPCR,数字 PCR 可让你能够直接数出 DNA 分子的个数,是对起始样品的绝对定量。