反转录－聚合酶链反应

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

PCR 是指在 DNA 聚合酶催化下，以亲代 DNA 为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸三步骤循环，在体外复制出与模板 DNA 序列互补的子链 DNA 的过程，能快速特异地在体外扩增任何目的 DNA 片段。定性、半定量和定量 PCR 技术在生物学和医学中的应用极其广泛，目前，半定量 PCR 的方法主要有 RT-PCR 等。

原理

半定量 PCR 中的 RT-PCR 的基本作用原理是以 RNA 为模板，用反转录酶合成 cDNA 链，再以 cDNA 为模板，通过 PCR 扩增合成目的 DNA 片段。

来源：丁香通实验团队

操作方法

反转录－聚合酶链反应

反转录－聚合酶链反应 (reverse transcriptionpolymerase chain reaction, RT-PCR ) 将 RNA 的反转录反应与 PCR 反应相结合，是最广泛使用的 PCR 方法。方法原理RT-PCR 的基本原理是以 RNA 为模板，用反转录酶合成 cDNA 链，再以 cDNA 为模板，通过 PCR 扩增合成目的 DNA 片段。RT-PCR 可检测到单个细胞中少