反转录pcr试剂盒中随机引物合成片段的原理是什么，大小会不会不一样

提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。

随机引物：某些特定mRNA由于含有使反转录酶终止的序列，比较难以转录成全长序列时，可采用非特异的随机引物来转录全长mRNA。选择这种引物，体系中所有RNA分子会全部充当DNA第一链模板，然后PCR引物在下游扩增过程中再扩增特异的目的基因。通常，用此引物合成的cDNA中，96%来源于rRNA。

Oligo(dT)：绝大多数真核细胞的mRNA具有3’端Poly(A+)尾，所以使用Oligo(dT)仅mRNA可被转录。由于Poly(A+)RNA仅占总RNA的1-4%，所以用这种引物合成的cDNA比随机引物得到的cDNA量少、复杂性小。

随机引物合成的片段的大小是会不一样

随机引物是指当特定mRNA由于含有使逆转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时，可采用随机六聚体这一非特异的引物来拷贝全长mRNA。大小是基本一致的