差异显示技术（DD）实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

D D 由 Liang和 Pardee在 1992年首次提出。至今有大约1700篇与 DD相关的文章发表，可见其影响巨大。许多与神经变性和凋亡相关的基因也通过DD 的方法得以鉴定。 .
DD的原理基于对cDNA分子进行随机扩增和随后按大小进行的分离。为此，首先需分离靶细胞或组织中总RNA，反转录为cDNA。
现代神经科学研究技术
作者：U.Windhorst & H. Johansson 翻译：赵志奇陈军

来源：丁香实验

操作方法

差异显示实验

一、.RNA 的分离 1.一般原则差异显示技术成功最关键的因素就是RNA 的质量。为了最大限度减少RNA的降解应做到： —戴手套一使用无菌器具。所有塑料器皿需在180℃ 过夜 —使用无RNA酶的玻璃器皿。所有的玻璃器皿都须在180L过夜一所有的缓冲液都必须去除RNA酶。因此，应使用DEPC处理过的重蒸水（将2.5 ml的DEPC力口入到2.5L的重蒸水中后高压）