利用 Polybrene 进行 DNA 转染实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

下面讲述的 Polybrene 与 DMSO 转染的方法是 Aubin 等（1997) 方法的改进。利用此方法可以有效地将质粒 DNA 转染中国仓鼠卵巢细胞与角化细胞，产生的转化体比磷酸钙-DNA 沉淀物方法的多 15 倍。但是使用高分子量 DNA 时两种方法的转染效率无明显差别。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

利用 Polybrene 进行 DNA 转染实验

材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需浓度。 DMSO(30%)/含血清培养基第 3 步使用 DMSO 前，将高效液相（HPLC) 纯或组织培养纯的 DMSO 加入含血清的细胞生长培养基中至终浓度 30%(V/V)。 Giemsa 染液（10%m/V) 使用前用磷酸缓冲盐或水配制，用 Whatman1 号滤纸过滤。甲醇 Polybrene(10