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简介
掌握核酸提取与纯化的方法,离心技术的合理使用.酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导
来源:丁香实验
操作方法
实验试剂: l. 饱和的熏蒸酚:市售AR经酚须在182度用空气冷凝管进行重蒸馏,冷却后加入8一羟基喹啉,使其浓度达到1g/L,向液体酚中加入等体0.5mlTris-HCL缓冲液(PH8.0),置磁力搅拌15min,抽取上层(水层)液体再加入等体积0.lmol/LTris-HCL缓冲液(pH8.0),同样搅拌15min,分相完全后吸取上层液体,最后向酚层(下层)加入1/10体积的含2g/L巯基二醇
🔥 磁珠法提取 DNA1、样本处理:核酸必须从细胞或其他生物物质中释放出来。(1)植物组织:液氮研磨或在特殊裂解液中电动匀浆;(2)动物组织:液氮研磨或裂解液中手动/电动匀浆;(3)血细胞:应用红细胞裂解液处理;(4)细胞:胰酶处理或蛋白酶 K 处理。2、DNA 纯化:磁珠提前 30 min 从冰箱拿出平衡。磁珠振荡混匀,取处理完成的裂解液 50 μl 中加入 50 μl 磁珠悬液,按 1:1 充分混匀,室温静置 5
🔥 DNA 提取的原理,步骤,优缺点总结总结了用不同方法提取 DNA 的原理,步骤,还有各个方法的优缺点。
🔥 离心柱法提取 DNA用离心柱法来提取 DNA,得到的 DNA 质量好,纯度和浓度较高。