如果你对 Western Blot 技术知其然而不知其所以然,如果你希望实现 Western Blot 小白的华丽变身,本节课程,Dr. 赛将带您了解一切。
本次研讨会将通过介绍CST Western Blot标准操作步骤,向您阐释WB操作中的关键点及注意事项,特别是影响最终结果呈现的样本制备和抗体孵育与检测。通过真实失败案例,如无信号、高背景、条带大小不正确、条带弯曲拖尾等,分析WB常见的问题及原因,并提供相应的解决策略。
WB 实验是最简单最基础最直观检测目标蛋白的手段,所以做生物研究的几乎都要接触,做好WB,就成了大家必修的一课。凡事预则立,不预则废。WB实验前,先在头脑里预演一下将要进行的WB实验,实操时就会免去过度的手忙脚乱。
蛋白质组学研究一直是生物研究领域最基本的和广泛的方向。随着科学研究的深入,高水平期刊和基金项目对蛋白质组学实验数据和结果的要求日趋严谨,定量可重复,具有统计学意义的数据至关重要。Western blotting 技术是蛋白质研究最常用的技术,针对定量可重复的蛋白纯度,WB 技术检测蛋白纯度及相关应用进行介绍和分享。 1. 蛋白浓度定量/除杂等样本前处理 2. 电泳技术 3. WB化学发光成像技术
免疫印迹又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中 的某种蛋白的方法。其基本流程是先将待检测样品溶解于含有去污剂和还原剂的溶液中,经过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离各组分,然后通过印迹技术把分离样品几乎原位、定量转 移到 NC 膜上。随后用特异抗体与 NC 膜上的靶抗原反应,结合上的抗体可用与辣根过氧化物 酶或碱性磷酸酶偶联的抗免疫
WB 作为传统的实验技术,在实验室中得到了广泛的应用。 讲座从 WB 的基础原理、实验流程及常见问题和解决方法等方面对此项技术进行全面的介绍,结合具体实验案例,深入浅出的对 WB 技术进行解析,无论实验新手还是富有经验的操作者,都可以从讲座中获得所需的知识,用于获得更为完美的 WB 实验结果。