都行都好我不生气
请教一下大家,想要验证一个核蛋白的表达差异,但是全蛋白一直跑不出来wb,怀疑是浓度低于是选择凯基生物的试剂盒分离胞质和核蛋白,但是提出来的核蛋白能跑出来gapdh还有一个膜蛋白指标,怎么避免胞质蛋白污染啊😭是不是我匀浆不够彻底
loveliufudan
在分离胞质和核蛋白时,胞质蛋白的污染是一个常见问题。通常可以采用以下方法来避免或减少胞质蛋白污染:
1.使用高品质的试剂和仪器:选择高品质的试剂盒和仪器能够有效地减少污染。
2.加强清洗步骤:在分离核蛋白之前,应当对细胞进行充分的清洗,以减少胞质蛋白的残留。
3.选择合适的分离方法:不同的分离方法有不同的效率和精确度。选择合适的分离方法能够有效地减少污染。
4.增加提取次数:如果可能的话,可以增加提取次数,以减少污染。
5.减少提取时间:尽量缩短提取时间,以减少污染。
如果你的全蛋白浓度很低,那么在分离胞质和核蛋白时,也可能会导致核蛋白浓度过低,从而导致分析结果不准确。因此,在分离胞质和核蛋白之前,应当充分考虑全蛋白浓度的问题。
土井挞克树
可以提纯,然后提高匀浆的浓度。
都行都好我不生气
请问一下要咋提纯呀,能不能请教一下详细的注意事项,非常感谢
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