核蛋白提取实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

亚细胞组分如细胞核的蛋白质组的完整性很大程度上由纯化过程中是否将其他细胞污染物从分离到的组分中除去决定。从植物中分离高纯度的细胞核是一个困难的任务。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。

来源：丁香实验

操作方法

核蛋白提取

( 1 ) 按照 Morre 和 Anderson 的方法从水稻悬浮细胞中分离细胞核，本文对方法进行了一些改动。所有分离细胞核的步骤都在冰上或 4°C 进行。 ( 2 ) 3000 g 离心 5 min 收集约 3 g 水稻悬浮细胞并重悬于 5 ml 冰浴预冷的 PBS 中。悬浮液再次用 3000 g 离心 5 min。沉淀用 5 ml 匀浆液重悬后转移至玻璃研钵中并研磨成匀浆。 ( 3 )