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湿转法就是转膜的时候,膜 胶等都是泡在转膜液中的,半干转,是做三明治夹心的时候,用转膜液赶走气泡等,然后直接加入电转仪,不用加电转液,两个方法都好用。
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半干法即将凝胶夹层组合放在吸有转印缓冲液的滤纸之间,通过滤纸上吸附的缓冲液传导电流,起到转移的效果。因为电流直接作用在膜胶上,所以其转移条件比较严酷,但是其转移时间短,效率高。关于转膜时间:半干转的话,20 V×30min即可。湿转(或者叫湿法)的优点是,可以对不论大分子量还是小分子量蛋白质,湿转都能比较稳定地转膜,不足之处在于后期缓冲液消耗较大,转印时间较长,并且需要注意做好降温措施。仅建议仪器购置经费十分有限,或者平时经常需要转膜大分子蛋白质的实验室考虑。
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半干法和湿法转移是两种不同的转移装置下的转移系统,将膜,胶,滤纸整个浸泡在buffer的Tank里转移的,叫湿法;用滤纸吸buffer来做转移体系的叫半干法。
半干法操作要求高,但 效率也高。湿法操作要求相对低,花时间多一些。
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