顽拗性植物组织的蛋白质组学研究（苯酚法提取蛋白质）实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

蛋白质提取除了经典的三氯乙酸（TCA ) /丙酮沉淀方法外，另一个可行的方法是苯酚提取法，该方法可以从富含多糖、脂质和酚类化合物的植物组织中有效地获得蛋白质。本章提出一种改良的实验方法，可用于双向电泳（2-DE) 和进一步的蛋白质组学研究。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。

来源：丁香实验

操作方法

顽拗性植物组织的蛋白质组学研究（苯酚法提取蛋白质）

3.1 蛋白质提取 ( 1 ) 新鲜植物组织在液氮中冷冻，然后在自动低温粉碎机中预先冷却的钢杯中将材料研磨成细碎的粉末（见注释 4) 。 ( 2 ) 在一个 15 ml 的离心管（falcon tube) 中加入 3 ml 提取缓冲液，并加入 1 g 研碎的植物组织，涡旋后在冰浴中振荡 10 min ( 见注释5) 。 ( 3 ) 加入等体积的 Tris 饱和苯酚，室温下振荡 10 min