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样品中有无机杂质影响蛋白含量测定,有什么办法能降低干扰?

相关实验:植物体内可溶性蛋白和非可溶性蛋白含量的测定实验

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ganglinliya

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4 个回答

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bamboopiggy

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蛋白质的测定方法有好多,如:凯氏定氮法,双缩脲法,folin-酚法,考马斯亮蓝法,等等,你可以找一种与你的无机杂质不反应的方法来测。

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府宅

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现有商业化微离心过滤装置用来除去污染物,离子交换层析可有效地去除非离子和两性去污剂。此外,SDS可以用纳米级亲水相层析或丙酮沉淀去除,在-20 ℃时效果比室温要好。对于两性去污剂的去除,凝胶过滤层析和去污剂亲和层析效果相当,略优于透析。同样,SPE (固相萃取) 在稀释的蛋白溶液中去除CHAPS很有效,比标准的透析或凝胶过滤层析有更好的效果。

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天一湖医者

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为提高蛋白质含量检测方法的抗干扰能力,从福林酚试剂法入手,以牛血清白蛋白为标准样品,重新设计制定实验试剂组成与配比等,获得蛋白质含量检测新方法,然后探讨新方法的适用检测波长范围和稳定性,并利用细胞全蛋白裂解液分析它对多种常见干扰物质的包容性.实验发现,新方法不仅能准确检测蛋白质含量,对蛋白质测定液中表面活性剂的耐受浓度,如十二烷基硫酸钠(SDS)、NP-40和TritonX-100分别达到10%、2%和1%;螯合剂乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)和Ethylene glycol bis (2-aminoethyl) tetraacetic acid(EGTA)则分别达25 mmol/L和1 mmol/L;对还原剂二硫苏糖醇(DTT)和β-ME的包容浓度均为1 mmol/L;而含氮化合物硫酸铵与尿素则分别为0.5 mol/L和4 mol/L.与原方法相比较,对常见干扰物质的耐受性有显著提高,说明新方法适用含多种干扰物质的蛋白质溶液,在生命科学研究领域具有广泛应用前景.

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dxy_gwrp7ndq

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蛋白样品中的盐类组分可使蛋白质发生沉淀和聚集,一般通过超滤,透析,TCA沉淀,凝胶过滤或者有机溶剂和固相萃取等方法经行除盐,另外也可用商品化的试剂盒进行除盐。

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