使用AdEasy构建腺病毒载体质粒，X10-gold扩增后，挑单克隆提质粒，PacI酶切线性化，并未出现两条条带！

通常情况下，提质粒和酶切是验证腺病毒载体质粒的常用方法，但是如果您希望避免浪费酶，也可以尝试使用PCR进行验证。以下是一些可能的方法：

1. 用限制性内切酶验证：您可以设计一对引物，将其扩增出期望的片段，然后使用限制性内切酶对扩增产物进行切割，以验证是否得到了正确的片段。

2. 用测序验证：您可以通过将扩增产物进行测序来验证是否得到了正确的片段。

酶切是最准确的，其他方法的准确度不足

pcr也是可以的，但是特异度肯定不如酶切