提问
提问
我要登录
|免费注册

重组腺病毒质粒,转化到重组酶缺失X10-GOLD感受态中,不长单菌落。为什么

相关实验:腺病毒载体实验

user-title

阿诺BP95


wx-share
分享

3 个回答

user-title

学习是为了少犯错

有帮助

有可能是未重组的质粒无法在感受态中复制.也就不会表达抗性标记基因。

user-title

loveliufudan

有帮助

分析起来,重组腺病毒质粒转化到重组酶缺失 DH10B 感受态中不能长单菌落的原因可能有:


1. 重组酶的缺失导致感受态细胞失去了同源重组的能力。


2. 重组腺病毒质粒中含有腺病毒序列,不能在大肠杆菌中复制。


3. 没有重组酶,质粒无法与感受态的基因组DNA进行同源重组。


4. 未重组的质粒无法在感受态中复制,也就不会表达抗性标记基因。


5. 因此转化子无法在选择培养基上生长形成单菌落。


6. 重组酶是进行同源重组的关键酶,它的缺失导致外源质粒无法整合到主体染色体上,无法在感受态中传递扩增。


所以综合来说,重组酶的缺失导致重组腺病毒质粒转化后无法进行同源重组,也就不能在大肠杆菌中传承,从而不能在选择培养基上生长形成单菌落。

user-title

毛利小五郎的徒弟

有帮助

首先可能是重组质粒纯化不足,所以不长单菌落,还有可能是感受态转化不足所以不长单菌落

user-title

阿诺BP95user-title

请问可能是质粒浓度不够么,想10微升质粒转化50微升感受态可以吗,谢谢

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序