秋水仙素诱导法

植物多倍体是指每个细胞内染色体组有三套以上的植物。人工诱发多倍体的方法有很多，本实验利用秋水仙素抑制纺缍丝的形成，使得染色体复制后不能向两极移动，同时细胞也不分裂，从而形成多倍体的原理，用适当浓度的秋水仙素处理洋葱或大蒜根尖，待根尖膨大后制片观察，可发现多倍体细胞。

1.种子催芽:将黑麦或大麦种子用自来水洗净并浸泡半小时,然后转入有浸润吸水纸的平皿中,于25℃培养箱中催芽36～48h。

2.秋水仙素处理:种子萌发至根长0.5～1.0cm,留下发芽的种子,用水洗净,吸干水,加入0.02%秋水仙素溶液,使萌发出的根尖浸泡在秋水仙素溶液中。盖上平皿,置25℃温箱中处理24h。

3.根尖的观察及固定:经处理之后,根尖膨大,形如鼓棰。取此种根尖,置青霉素瓶中,用甲醇∶冰醋酸(3∶1)固定液固定6h后弃去固定液,继续下列步骤或加入70%酒精于4℃冰箱中保存。

4.根尖处理及压片:弃去固定液或酒精,加入60℃预热的1mol/L盐酸,于60℃水浴锅中解离10min。弃去盐酸,用自来水将根尖反复清洗几遍,以彻底洗净盐酸。用石炭酸品红染色后,即可进行压片观察,鉴别根尖细胞染色体加倍情况。